合肥巅峰生物蛋白酶K
重组蛋白酶K质量检测报告及使用说明
产品简介:
蛋白酶K是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,从林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中纯化得到,用于生物样品中蛋白质的一般降解。该酶有两个ca2+结合位点,它们离酶的活性中心有一定距离,与催化机理并无直接关系。然而,如果从该酶中除去ca2+,由于出现远程的结构变化,催化活性将丧失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性,在尿素和SDS中也较为稳定,还具有降解天然蛋白质的能力。
蛋白酶K的用途广泛,主要的应用行业包括:医疗及基础研究领域:基因诊断试剂盒;基因组DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒中去除DNA和RNA制备中的核酸酶;此外,还应用于:皮革工业(皮革软化及精细化、脱毛和软化、蚕丝脱胶)制备脉冲电泳的染色体DNA;提取组织中非蛋白成分时,降解含有蛋白质杂质;食品、酿造工业:肉类嫩化、酒类澄清;洗涤工业:酶洗衣粉、洗衣液等也有应用。
规格:100毫克普通装或客户定制
比活性值:38 U/mg蛋白
来源种属:酵母菌
分子质量:28,650
贮存和使用
干粉条件下有效期为24个月,液态时—20℃保存12个月。客户利用缓冲液溶解后,需要—20℃贮存。溶解后,最好分装成若干份,方便使用,避免反复冻溶。如果需要在2-8℃环境下放置,超过三天,建议过滤除菌或加入抑菌剂如3%叠氮化钠,防止微生物污染。
稀释缓冲液
根据需要,利用20mM Tris-HCL 缓冲液(PH 7.5)溶解成20mg/ml的工作浓度。
质量说明
活性单位定义 |
37℃、PH7.5条件下,每分钟可水解底物酪蛋白生成1μmol酪氨酸所需蛋白酶K的量,定义为一个单位。 |
脱氧核糖核酸酶残留 |
以λDNA为底物,37℃消化4小时以上,未检测到脱氧核糖核酸酶活性。
|
核糖核酸酶残留 |
37℃消化12小时以上,未检测到核糖核酸酶活性。 |
酶纯度测定(SDS—PAGE)
结果:蛋白酶K纯度超过99.2%(扫描SDS—PAGE胶)。
酶活性测定
蛋白酶K比活性值 |
||
产品来源 |
本产品 |
Sigma |
比活性值(U/mg) |
38 |
>30 |
酶稳定性测定(—20℃冷冻条件下,12个月的数据)
结果:干粉状态正确储存,一年内酶活性保持不变;溶解状态酶活性一年内降低小于2%。
酶质检结果(来自于某大型生物技术有限公司)
序号 |
检验项目 |
检验标准 |
是否合格(合格√) |
1 |
动物基因组提取(蛋白酶K浓度为20mg/ml) |
不影响动物基因组的有效提取 |
√ |
与不加蛋白酶K的样品相比,能有效降解蛋白质 |
√ |
||
2 |
降解蛋白质能力 |
与15ugBSA37℃孵育1小时,BSA可有效降解 |
√ |
质检结论:合格(√) 让步放行( ) 需要复检( ) 不合格( ) |
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